根據《中國藥典》2015年版純化水微生物限度檢查要求，具體操作標準如下：

一、核心檢查方法：薄膜過濾法

?樣品處理?

取純化水樣品不少于1ml（實際操作中常取50ml或100ml以提高檢測靈敏度）；

通過孔徑為0.45μm的混合濾膜（直徑50mm）過濾，減壓抽干。

?培養與計數?

過濾后取出濾膜，貼敷于R2A瓊脂培養基平板上；

在30–35℃培養箱中培養3天后進行菌落計數

（2）過濾操作

將浸泡后的濾膜置于過濾裝置濾網上，用無菌鑷子固定；

注入樣品溶液，啟動真空泵抽濾至濾膜無水滴殘留；

用100ml緩沖液（如0.9%氯化鈉溶液）沖洗濾膜3次，去除干擾物。

（3）培養觀察

將濾膜貼合于R2A平板，避免氣泡產生；

每日觀察記錄菌落生長情況（24h、48h、72h）

注意事項

?樣品體積選擇?：

中國藥典規定至少1ml，但實際建議取10–100ml以提升痕量微生物檢出率；

美國/歐洲藥典推薦使用10ml樣品。

?防止污染措施?：

操作需在超凈工作臺中進行；

過濾裝置使用前需用乙醇或次氯酸溶液進行管路消毒。

?結果有效性?：

若陰性對照長菌，需重新檢測并排查滅菌環節